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蛋白酶的分类与功效,冰峰化工

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         蛋白酶,英文名Protease,是水解蛋白质肽链的一类酶的统称。蛋白酶的分类方式有很多:根据它水解多肽的方式,一般分为内肽酶和外肽酶,顾名思义,可知内肽酶是在蛋白质分子的内部,将大分子量的多肽切断成小分子量的朊和胨,外肽酶则则是从外部,也就是在蛋白质分子的末端,水解游离的羧基或者氨基上的肽键,形成氨基酸,因此外肽酶又有羧基肽酶和氨基肽酶之分;根据蛋白酶的活性和最佳PH值,则又有天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、巯基蛋白酶和丝氨酸蛋白酶之分;蛋白酶也可以分为酸性,中性和碱性,这是根据其反应的最佳PH值来区分的。实际上,据化源网资料,单单不同Cas号的蛋白酶就有60余种。内肽酶在工业上的应用最为广泛。

  蛋白酶分布很广,天然存在于动植物中,微生物中也广泛存在着蛋白酶,工业上一般是通过微生物发酵的方式生产蛋白酶,主要是用细菌(枯草杆菌)及霉菌(栖土曲霉),有时也用酵母及放线菌。蛋白酶种类非常多,而且不同蛋白酶的催化作用选择性很严格,一般一种蛋白质酶只作用某些特定的肽键。

  胃蛋白酶又称胃酶,一般来源于猪,临床上主要是用于给缺乏胃蛋白酶的患者补充胃蛋白酶,改善消化不良等相关症状,也可以用于促进人体快速吸收注射药液,缓解肿痛。

  胰蛋白酶可以水解细胞间的蛋白质,将不同的细胞进行分离,其分离细胞活性的主要因素有温度、浓度及作用的时间,最佳反应温度是37摄氏度,PH=8.0,所以有时为了避免过度分离,一定要控制相关反应条件。胰蛋白酶在医学中同样有很广泛的应用:胰蛋白酶不仅能够像消化酶一样帮助消化,同时还能促进分解浓稠的痰液和血凝块,稀释后快速排除体外;胰蛋白酶还可以通过促进伤口肉芽组织的增生,发挥抗炎效果,加速伤口愈合。实际使用时配置胰蛋白酶溶液时应避免选择含有钙离子,镁离子的BSS,确保胰蛋白酶的活性不会被降低。如果需要终止胰蛋白酶的消化作用,可以选择血清培养液或者使用相应的酶抑制剂。另外,由于蛋白酶的强选择性,所以不同组织对于胰蛋白酶的反应强度也是不一样的,胰蛋白酶并不能对所有组织起效果。

  1. 称取胰蛋白酶:准备PH值7.2的双蒸水,或者PBS(D-hanks),称取适量胰蛋白酶,控制浓度为0.25%,搅拌混匀,冷藏过夜,温度控制在4摄氏度。

  2. 抽滤消毒:准备好注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜),在超净台内对胰蛋白酶溶液抽滤消毒,分装于专用小瓶,冷冻保存,温度控制在-20摄氏度。

  霉菌蛋白酶、细菌蛋白酶和植物蛋白酶则常用于烘培工业,通过分离细胞的方式断开面筋,形成网状,增加面筋的弹性,同时通过水解蛋白质,供给酵母碳源,促进面团的发酵。
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